阿尔茨海默病（AD）是一种复杂的神经退行性疾病，涉及多种病理机制，包括β-淀粉样蛋白堆积和Tau蛋白异常磷酸化。传统药物通常只针对单一靶点，疗效有限，而多靶点药物（MTDLs）能够同时影响多个靶点，但这种药物的设计难度极高，通常依赖偶然发现。

近期，中国药科大学的研究团队在《Journal of Medicinal Chemistry》上发表了题为“Polypharmacological Drug Design Guided by Integrating Phenotypic and Restricted Fragment Docking Strategies”的文章，提出了一种创新的多药理药物设计策略。这一策略结合了表型筛选和受限片段对接（RFD）方法，为阿尔茨海默病药物研发提供了新的思路和方法。

受限片段对接（RFD）方法

作者首次将表型筛选与片段对接相结合，通过定义重叠的化学空间，高效设计出多靶点配体。这种方法能够揭示RIPK1、MAP4K4和ALK在微胶质细胞坏死性凋亡中的协同作用，为阿尔茨海默病治疗提供了新颖的靶点组合。

LP-10d的多效性

单一分子LP-10d能够同时改善AD的病理标志（如Aβ和Tau），并促进神经再生，突破了传统单靶点药物的局限性。

研究成果

基于机制的siRNA筛选

研究者首先构建了TLR4诱导的小胶质细胞坏死性凋亡表型，通过基于机制的siRNA筛选，确定了MAP4K4和ALK是与RIPK1协同作用的潜在靶点。联合使用RIPK1、MAP4K4和ALK的选择性抑制剂，发现多靶点低剂量抑制模式可以显著增强小胶质细胞的保护作用。

Silico-MTDL设计中的RFD

通过限制性片段对接共同靶向RIPK1、MAP4K4和ALK，利用RIPK1的蛋白结构开展定制化的高通量虚拟筛选，获得了有潜力的片段化合物，并经过优化得到了LP-5b。通过RFD方法的诱导契合对接，验证了方法的可靠性。同时，对模板MTDL的结构活性关系（SAR）研究最终筛选出LP-10d作为最佳配体，显示出其对小胶质细胞坏死性凋亡的纳摩尔级效力。

LP-10d的验证及效果

LP-10d作为针对RIPK1、MAP4K4和ALK的脑穿透化合物，在AD转基因小鼠模型中展现出显著的保护效果。在APP/PS1和3xTg小鼠模型中，LP-10d显著改善了空间学习和记忆能力，效果优于Nec-1s，表明其能够改善或逆转阿尔茨海默病的早期认知障碍。此外，LP-10d在3xTg小鼠中展示了多种阿尔茨海默病样病理表现的药物性。

总结

尽管多靶点药物设计面临诸多挑战，基于片段的药物设计（FBDD）及表型筛选展示了广泛的应用潜力。然而，目前针对超过两个靶点的合理药物设计方法仍较为匮乏。本研究利用小胶质细胞坏死性凋亡表型和RFD方法，成功设计出针对RIPK1、MAP4K4和ALK的多靶点配体LP-10d，并在阿尔茨海默病小鼠模型中展现出良好的效果。这为多靶点药物的发现提供了创新的思路，未来的研究将进一步推动阿尔茨海默病的治疗进展。同时，我们也期待尊龙凯时在生物医学领域的不断创新和突破，为患者带来新的希望。